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编码米曲霉果糖基转移酶基因在大肠杆菌中的重组表达
编码米曲霉果糖基转移酶基因在大肠杆菌中的重组表达
作者:
岳娟
张毅
林晓珊
王玉海
王鹏
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
蔗果寡糖
果糖基转移酶
大肠杆菌
蛋白表达
摘要:
为了大量获得果糖基转移酶,本文通过RT-PCR扩增获得米曲霉果糖基转移酶基因,连接到大肠杆菌pEASY-E1质粒上,并转化到大肠杆菌BL21-DE3菌株中成功表达,通过对重组菌诱导表达条件的优化,最终确定在诱导温度为25℃,诱导剂异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度为1.0 μmol/mL的条件下,该重组酶可以顺利表达.利用重组质粒PEASY-S1上的6×组氨酸标签,用亲和层析的方法纯化能够得到较高纯度的果糖基转移酶.以蔗糖为底物,用该酶进行果糖基转化生产低聚果糖的实验结果表明:重组果糖基转移酶具有一定催化能力,其酶活力达到59.0 U/g,且在低温诱导时稳定表达,具备一定的潜在开发利用价值.本实验成功在大肠杆菌中重组表达出果糖基转移酶,并且能够短时间内、大量表达具有催化活性的果糖基转移酶,可望为果糖基转移酶的工业化提供理论基础.
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篇名
编码米曲霉果糖基转移酶基因在大肠杆菌中的重组表达
来源期刊
现代食品科技
学科
关键词
蔗果寡糖
果糖基转移酶
大肠杆菌
蛋白表达
年,卷(期)
2014,(9)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
67-72,178
页数
7页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.13982/j.mfst.1673-9078.2014.09.012
五维指标
作者信息
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姓名
单位
发文数
被引次数
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G指数
1
王鹏
68
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12.0
17.0
2
林晓珊
26
154
6.0
11.0
3
张毅
56
445
12.0
19.0
4
王玉海
2
2
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5
岳娟
2
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期刊影响力
现代食品科技
主办单位:
华南理工大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1673-9078
CN:
44-1620/TS
开本:
大16开
出版地:
广州五山华南理工大学13号楼
邮发代号:
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
8253
总下载数(次)
35
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