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Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP重组蛋白的表达及广谱性NDV单克隆抗体的制备
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摘要：
为了制备针对ClassⅠ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP蛋白的单克隆抗体,采用RT-PCR方法从Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株中扩增出NP基因,并定向克隆至pET-32a-c(+)原核表达载体中,经酶切鉴定及测序验证后转化BL21 (DE3)进行原核表达,用纯化得到的NP重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠.结果显示,成功表达出分子质量约为71 ku的NP重组融合蛋白,SDS-PAGE结果显示,表达的蛋白以可溶性形式存在于菌体中.用间接ELISA方法成功筛选出2株针对Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP蛋白的单克隆抗体,该抗体具有良好的ELISA、IFA以及Western-blot效价.免疫特异性鉴定结果表明,获得的2株单克隆抗体具有良好的通用性,无论是Class Ⅰ毒株还是两种不同基因组长度的ClassⅡ毒株,均能与其发生特异反应.
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期刊影响力
中国兽医科学
主办单位：
中国农业科学院兰州兽医研究所
出版周期：
月刊
ISSN：
1673-4696
CN：
62-1192/S
开本：
大16开
出版地：
甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号
邮发代号：
54-33
创刊时间：
1971
语种：
chi
出版文献量（篇）
5432
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